磷酸钙细胞转染试剂盒基于磷酸钙-DNA沉淀的原理。简单来说,磷酸钙可促使细胞膜和DNA的结合,之后通过细胞内吞的作用将外源DNA转入目的细胞。磷酸钙转染法涉及DNA、氯化钙与磷酸缓冲液混合,形成包含DNA的极小不溶解的磷酸钙颗粒。这些颗粒会粘结到细胞膜上,并通过胞饮作用进入细胞,从而实现外源质粒的转染。
磷酸钙细胞转染试剂盒产品应用:
1. 高效转染:磷酸钙细胞转染试剂盒特别适合于293或293T细胞的转染,优化条件后转染效率可高达90%以上,通常也很容易达到40-50%的转染效率。
2. 细胞多样性:不仅适用于大多数贴壁细胞的转染,也适用于一些悬浮细胞的转染。常见的细胞如Hela、CHO等也适用,但效率可能略低于293细胞。
3. 科研应用:本试剂盒仅限于科研实验,广泛应用于细胞生物学、基因功能研究等领域。例如,在人iPS细胞的诱导及诱导体系的优化研究中,磷酸钙转染法显示出其高效性和易用性。
4. 注意事项:使用时应确保质粒的高纯度,且二氧化碳的浓度应控制在一定范围内(通常建议3%左右)。此外,BBS溶液的pH值对转染效率有直接影响,应避免长时间暴露在空气中。
综上所述,磷酸钙细胞转染试剂盒以其高效、多用的特点,在科研实验中发挥着重要作用。